解放軍文職招聘考試原位PCR技術(shù)的基本原理-解放軍文職人員招聘-軍隊文職考試-紅師教育
發(fā)布時間：2017-10-06 21:59:53原位PCR技術(shù)的基本原理，就是將PCR技術(shù)的高效擴增與原位雜交的細(xì)胞定位結(jié)合起來，從而在組織細(xì)胞原位檢測單拷貝或低拷貝的特定的DNA或RNA序列。PCR技術(shù)是在DNA聚合酶的作用下，經(jīng)過模板的變性、退火和引物延伸三種循環(huán)，將引物引導(dǎo)下的特異性靶序列迅速地進行擴增，經(jīng)過擴增的靶序列（一般能擴增106倍），很容易在凝膠電泳或Southern印記雜交中顯示出來，因此，PCR技術(shù)具有靈敏度高，特異性強的優(yōu)勢，隨著熱循環(huán)自動化的提高與穩(wěn)定也使得PCR技術(shù)的操作簡便易行。但是，PCR技術(shù)是在液相中進行的，在擴增前，需將細(xì)胞破壞，從中提取核酸作為模板，因此很難將PCR的結(jié)果與組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)聯(lián)系起來，同時，也很難判斷含特異性靶序列的細(xì)胞類型。原位雜交技術(shù)是將分子雜交與組織化學(xué)技術(shù)結(jié)合起來，用標(biāo)記的DNA或RNA為探針，在原位檢測組織細(xì)胞內(nèi)的特定DNA或RNA序列，因此，在顯示陽性雜交信號（即特定的DNA或RNA）時，不僅能判別含有靶序列的細(xì)胞類型，還能顯示組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與病理變化。但是，原位雜交對拷貝數(shù)較少的序列檢出有一定的困難，而單拷貝序列或低拷貝序列（10-20拷貝的RNA或單拷貝DNA），則不能被檢出，所以原位雜交的敏感性不夠。原位PCR技術(shù)成功地將PCR技術(shù)和原位雜交技術(shù)結(jié)合起來，保持了兩項技術(shù)的優(yōu)勢又彌補了各自的不足。原位PCR技術(shù)的待檢標(biāo)本一般先經(jīng)化學(xué)固定，以保持組織細(xì)胞的良好形態(tài)結(jié)構(gòu)。細(xì)胞膜和核膜均具有一定的通透性，當(dāng)進行PCR擴增時，各種成分，如引物，DNA聚合酶，核苷酸等均可進入細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞核內(nèi)，以固定在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞核內(nèi)的RNA或DNA為模板，于原位進行擴增。擴增的產(chǎn)物一般分子較大，或互相交織，不易穿過細(xì)胞膜或在膜內(nèi)外彌散，從而被保留在原位。這樣原有的細(xì)胞內(nèi)單拷貝或低拷貝的特定DNA或RNA序列在原位以呈指數(shù)極擴增，擴增的產(chǎn)物就很容易被原位雜交技術(shù)檢查。
2017解放軍文職公共基礎(chǔ)知識之科學(xué)技術(shù)的含義-解放軍文職人員招聘-軍隊文職考試-紅師教育
一、科學(xué)的含義科學(xué)是人對客觀世界的認(rèn)識，是反映客觀事實和發(fā)展規(guī)律的知識，是關(guān)于自然界、社會和思維發(fā)展的知識體系?？茖W(xué)可以分為自然科學(xué)、社會科學(xué)和思維科學(xué)，以及總括和貫穿于三個領(lǐng)域的哲學(xué)和數(shù)學(xué)?？茖W(xué)標(biāo)志著人的認(rèn)識在實踐過程中從現(xiàn)象到本質(zhì)的深化，由經(jīng)驗水平到理性水平的升華。二、技術(shù)的含義技術(shù)是指人類在利用、改造和保護自然的過程中，通過創(chuàng)新所積累的經(jīng)驗、知識、技巧及共同協(xié)作組成的工具和規(guī)則體系。現(xiàn)代技術(shù)已發(fā)展成為一個龐大復(fù)雜的系統(tǒng)，主要由三大基本技術(shù)，即物質(zhì)變化技術(shù)、能量轉(zhuǎn)換技術(shù)和信息控制技術(shù)組成?，F(xiàn)代技術(shù)對社會發(fā)展、經(jīng)濟發(fā)展等起著重大作用，其中典型代表的門類有：信息技術(shù)、生物工程技術(shù)、環(huán)保技術(shù)、空間技術(shù)、航空技術(shù)、能源技術(shù)等。
